作者：顧杰 單位：陜西中醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院

實驗標本帶來的生物安全隱患實驗標本的來源多樣，生化檢測時使用的體液或血液標本，很可能攜帶有ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＥＶ、ＨＩＶ、巨細胞病毒等具備生物危害性的各類感染因子，盡管處理這些標本的都是專業(yè)實驗室技術(shù)人員，但由于標本情況未知或說明中缺乏相關(guān)描述，因此仍存在有很高的接觸風險。在對這些樣品進行離心分離或渦旋混合的過程中，產(chǎn)生的氣溶膠會嚴重威脅到實驗人員的健康。進行標本內(nèi)活細胞的分析／分選、ＣＤ３／ＣＤ４／ＣＤ８淋巴細胞表面抗原檢測、腫瘤細胞ＤＮＡ／ＲＮＡ含量分析、免疫細胞檢測等操作時，會使用到流式細胞儀等大型儀器。大部分的流式細胞儀都安裝在開放實驗室中［４］，在這種非隔離的環(huán)境條件下，實驗人員的粘膜及皮膚一旦與標本的濺液直接接觸，也可能對實驗人員造成感染。

實驗動物帶來的生物安全隱患在動物實驗中，不可避免的需要使用到注射器、手術(shù)刀和其他種類的“利器”。如果實驗室工作人員的皮膚因此受損，受到感染的概率會大大增加。實驗動物本身的質(zhì)量是最為關(guān)鍵的因素。使用微生物學質(zhì)量不合格的實驗動物，很可能引入各種類型的人獸共患病或動物烈性傳染病病原體。例如，２０１０年東北農(nóng)業(yè)大學的一次羊活體動物實驗中，由于未對羊進行嚴格檢驗，而致使２８名師生感染布魯氏桿菌，造成了嚴重的生物安全事故。另外，即便是清潔級的實驗動物，同樣可能攜帶生物感染因子。實驗動物自身的屬性決定了其作為獨立的生命體，攜帶微生物的概率與普通物品相比高出很多。而實驗動物又只能經(jīng)潔凈運輸和外包裝消毒完成凈化［５］，無法接受其他更為直接的消毒方式，因此更易攜帶感染因子。需要引起重視的是，在實驗動物的日常飼養(yǎng)過程中，管理不當同樣可能導(dǎo)致原本潔凈的實驗動物受到病原微生物的污染。如果被感染的動物通過呼吸、糞便和尿液將病原體傳播至整個室內(nèi)環(huán)境，而實驗人員恰好疏于防護，就很有可能因接觸到污染物而被感染。２００７年３月，廣州市某高校實驗動物中心發(fā)生的腎綜合征出血熱感染事件［６］，便是因為野鼠將病毒傳播至開放飼養(yǎng)區(qū)大白鼠，最終導(dǎo)致實驗室工作人員感染發(fā)病的。

實驗試劑及廢棄物帶來的安全隱患醫(yī)學研究涉及的生化試劑種類繁多，性能和毒性各自不同。常見的劇毒種類有溴化乙錠、Ｔｒｉｚｏｌ、丙烯酰胺、ＤＥＰＣ、甲酰胺等。在操作這些試劑的過程中，通過氣溶膠產(chǎn)生擴散污染是最常見的危害方式［７］。例如在吸取氯仿、四氯化碳等有毒揮發(fā)性氣體時，氣溶膠會直接刺激和腐蝕實驗人員的皮膚、眼睛、呼吸道等。若被實驗人員大量吸入，則可對其造成嚴重的肝腎損傷。實驗廢棄物，具有攜帶各種類型感染因子的可能。較為常見的種類包括沾有殘液的廢棄槍頭、ＥＰ管、針頭等等，均需小心處理。除此之外，對基因操作完成后產(chǎn)生的抗藥性菌株，也需完全滅活后才可丟棄。這些抗藥性菌株是經(jīng)過增殖、重組、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟之后，篩選出的陽性克隆，一旦隨意丟棄任其與環(huán)境中的致病菌交換遺傳物質(zhì)，令致病菌由此獲得抗藥性，則會引發(fā)相當嚴重的后果。

開展生物安全培訓(xùn)在實際工作中，預(yù)防實驗室生物安全事故的最有效措施，是做好人員的培訓(xùn)工作。生物安全意識，需要從人員進入實驗室的第一天起開始培養(yǎng)，即設(shè)立完整的生物安全專項培訓(xùn)計劃。在培訓(xùn)過程中，可以考慮以下幾個重點問題：首先，讓被培訓(xùn)人員了解實驗室內(nèi)容易發(fā)生感染的途徑及原因，提高自身的安全防范意識，盡量避免如誤食、皮膚切割、針刺、動物抓咬以及有害氣體吸入等導(dǎo)致的實驗室感染事故的發(fā)生［８］。其次，針對實驗內(nèi)容，進行操作技術(shù)方面的具體培訓(xùn)，從而讓被培訓(xùn)人員充分掌握生物安全操作的整個流程。如高壓滅菌器、生物安全柜、通風櫥和超凈工作臺等生物安全設(shè)備的使用方法；移液管和電動移液器使用方法；標本在每一個操作過程中的處置標準及廢棄物處理；個人防護措施；誤操作的處理辦法等內(nèi)容。有數(shù)據(jù)顯示，實驗室感染中６５％以上的感染是由氣溶膠引起的［９］。因此需要特別強調(diào)氣溶膠的重要性，輕柔操作易產(chǎn)生氣溶膠的步驟，包括離心、混合震蕩、電動勻漿、移液器吹打、開啟橡膠瓶塞、去注射器針頭等，以最大程度的減少空氣污染。在整個培訓(xùn)結(jié)束后，可利用考核的方式檢驗培訓(xùn)效果，凡取得培訓(xùn)合格證的人員才允許開展相關(guān)實驗。

加強實驗室制度建設(shè)實驗室安全事故的嚴重后果，充分說明了加強實驗室制度建設(shè)的重要性和迫切性。世界衛(wèi)生組織１９８３年頒布的《實驗室生物安全手冊（第一版）》是全世界第一部有關(guān)實驗室生物安全和減少實驗室事故發(fā)生的指導(dǎo)性規(guī)程，該手冊經(jīng)過２００３年及２００５年的兩次改版，已被世界各地廣泛接受和使用。經(jīng)過了多年的發(fā)展，我國也已出臺多部有關(guān)實驗室生物安全的國家標準，如ＧＢ１９７８１－２００５《醫(yī)學實驗室安全要求》、ＧＢ１９４８９－２００８《實驗室生物安全通用要求》、國務(wù)院令第４２４號《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等。在實驗室管理過程中，需要嚴格執(zhí)行這些指導(dǎo)性要求。除了指導(dǎo)性要求建立的制度框架之外，對于本單位的實際情況，還可以設(shè)立各項詳細的生物安全管理制度及規(guī)范，全面提升管理的有效性。例如，評估實驗的生物安全風險級別；動物管理制度；實驗日志制度；值周制度；違規(guī)懲罰制度；冰箱及超低溫冰箱試劑樣品保存制度；儀器操作規(guī)范；個人防護要求；安全消毒程序；危險隱患報告程序；生物安全事故應(yīng)急體系和預(yù)案等。從而最大程度的避免和控制這類生物安全事故的發(fā)生。

緊抓思想監(jiān)督從已被報道的多起生物安全事故中不難發(fā)現(xiàn)，與實驗人員麻痹大意有關(guān)的意外事件占了很大比例。２００３～２００４年間，新加坡、中國臺灣和中國大陸三地實驗室，就曾分別發(fā)生因?qū)嶒炄藛T疏忽而造成的ＳＡＲＳ實驗室感染事故?？梢哉f，主觀上不遵守實驗室的安全操作規(guī)則和程序，即便有再完善的設(shè)備和標準的操作程序也無法杜絕所有安全事故的發(fā)生。通常情況下，任何一位初進實驗室的人員，都會在種種警告下格外小心，完全按照標準化規(guī)范進行操作，但久而久之后卻會在思想上有所松懈，產(chǎn)生一系列不安全行為。如使用高壓滅菌鍋時，隨意減少滅菌時間或壓力，導(dǎo)致滅菌效果無法保證；超速離心機轉(zhuǎn)子在兩端未完全配平的情況下離心，離心管出現(xiàn)破損，導(dǎo)致樣品外溢；實驗過程中，省略必要的防護；操作不夠輕柔，產(chǎn)生不必要的氣溶膠懸浮污染；人疲勞操作，引發(fā)不安全行為等。因此，實驗室管理人員，在努力提高自身業(yè)務(wù)能力的同時，需進一步改進管理方式，提高效率，保證效果。只有管理者和被管理者共同努力，才可能將事故的風險降至最低。日常工作中，除了管理人員監(jiān)督之外，積極的引導(dǎo)每位實驗成員參與到思想監(jiān)督的工作中去。實行周內(nèi)負責制，管理人員帶班的研究生值日制等方式，均可作為很好的思路進行嘗試。